背景技术
二硫化硫胺又称硫胺素二硫化物（Thiamine Disulfide），它是由两个硫胺素（维生素B1）分子通过二硫键结合形成的化合物。二硫化硫胺在医药领域中具有重要的应用价值，尤其是在治疗某些疾病时作为维生素B1的补充剂使用。尽管二硫化硫胺的使用日益广泛，然而，目前国内外药典中均未收载该物质的专门检测方法和相关标准，关于二硫化硫胺纯度和有关杂质的检测方法在全球范围内的标准化药典中仍然存在缺失。
中国药典2020年版：使用的是单一流动相组成，导致二硫化硫胺中特定杂质的分离不充分；色谱柱的尺寸和流动相组成未针对二硫化硫胺进行优化，影响检测的灵敏度和分辨率。
USP2023：尽管使用了复杂的流动相配置，但同样没有特别设计来适应二硫化硫胺的化学结构和解离特性，结果是分析的效率和精确度受到限制。
JP18：采用的等度洗脱方法在处理复杂样品时表现不佳，限制了不同组分的有效分离，进而影响了分析结果的可靠性；尤其是在pH值设置未针对二硫化硫胺特性进行优化的情况下，影响了分析的峰形和分辨率。
相比之下，欧洲药典（EP11.7）中的有关物质检测方法更适用于二硫化硫胺的分析，但是二硫化硫胺由于其化学结构和物理性质的特殊性，对分析方法的要求较高，而EP11.7的标准方法在以下几个方面不足以提供最优的检测结果。溶解性问题：二硫化硫胺具有较差的水溶解性，而EP11.7中通常使用的水基流动相可能不足以完全溶解样品，导致样品在色谱分析中的峰形展宽和尾拖现象。这种溶解性问题可能导致检测灵敏度和精确度的降低。
尽管上述各国的药典提供了一个基础框架，但是针对二硫化硫胺的具体分析需要更多定制化的方法来应对其独特的化学和物理特性，因此，开发一种专门针对二硫化硫胺产品纯度的的高效液相色谱法检测方法显得尤为重要。
检测方法[1]
S1：硬件配置及参数设定：在高效液相色谱仪中，选择型号为Welch Xtimate C18，4.6mm×250mm,5μm规格的色谱柱；设置色谱柱工作温度为30℃；检测波长为248nm；进样体积为10μl；
S2：选择流动相：流动相A为浓度0.02mol/L己烷磺酸钠溶液；流动相B为HPLC级甲醇；流动相C为HPLC级乙腈；
S3：制定洗脱程序：初步洗脱：在0‑3分钟，流动相A和流动相B洗脱的体积比为90:10；在3‑27分钟，将流动相A、流动相B和流动相C的体积比逐步调整为70:15:15；在27‑35分钟，维持洗脱流动相中流动A相、流动B相和流动C相的体积比为70:15:15不变进行洗脱作业；在35‑42分钟，将流动相A、流动相B和流动相C的体积比逐步调整为50:25:25；在42‑43分钟，将流动相A、流动相B和流动相C的体积比逐步调整为90:10:0；设定洗脱流动相的流速为为1ml/min；
S4：溶液配置：使用5%醋酸溶液作为溶剂，分别制备浓度为1.0mg/ml的二硫化硫胺产品的样品溶液和浓度为0.3μg/ml的二硫化硫胺产品的灵敏度溶液；
S5：高效液相色谱仪性能验证：依照步骤S1‑S3的色谱条件要求，用液相色谱法对灵敏度溶液进行检测，得到灵敏度溶液检测色谱图，对灵敏度溶液检测色谱图进行分析，得出二硫化硫胺峰面积信噪比为148，满足检测要求；
S6：样品溶液检测：采用经过验证的高效液相色谱仪，依照步骤S1‑S3的色谱条件要求，使用液相色谱法对样品溶液进行检测；得到样品溶液的检测色谱图，如图所示；
S7：色谱图分析：对样品溶液的检测色谱图进行分析，得出二硫化硫胺产品的纯度值为94.99%。
参考文献
[1] 南京恩泰医药科技有限公司. 一种基于液相色谱法检测硫胺素二硫化物产品纯度的方法:CN202411252368.7[P]. 2024-11-08.