简介
人结肠癌细胞（如SW620细胞）是来源于人结肠腺癌的恶性肿瘤细胞，具有无限增殖、形态异常及易侵袭转移的生物学特征，是结肠癌体外研究的经典模型。苏木素-伊红（HE）染色可清晰观察其形态变化：活细胞核呈蓝紫色、细胞质为淡红色，凋亡细胞则表现为核染色质致密浓缩。研究表明，桦木酸处理人结肠癌细胞后，可显著抑制细胞增殖，诱导细胞出现典型的凋亡形态改变，且效应随药物浓度升高而增强，为结肠癌的天然药物干预研究提供了重要依据[1]。
人结肠癌细胞的性状
培养方法
用于人结肠癌细胞培养的完全培养基，需先将血清、青霉素-链霉素溶液（双抗）解冻，经1000 rpm离心5 min后，将血清与双抗依次加入基础培养基中，摇匀后配置成含10%血清及1%双抗的完全培养基，置于4℃冰箱保存；人结肠癌细胞冻存液则按照基础培养基:血清:DMSO=55:40:5的比例配制，置于4℃避光保存；用于人结肠癌细胞增殖检测的5 mg·mL⁻¹ MTT溶液，需称取50 mg MTT粉末，加入10 mL PBS溶液，摇匀并过滤后，置于4℃避光保存，且需在2周内用完[1]。
苏木素-伊红（HE）染色法观察桦木酸对人结肠癌细胞形态的影响
取对数生长期的人结肠癌细胞，消化离心收集后调整细胞浓度为每1mL含5×10⁵个细胞，接种于预置洁净爬片的6孔板中，每孔加2mL细胞悬液，培养24h后分组给药（空白组0μmol·L⁻¹、低剂量组10μmol·L⁻¹、中剂量组20μmol·L⁻¹、高剂量组40μmol·L⁻¹），继续培养48h；吸弃旧培养基，PBS清洗1次，4%多聚甲醛室温固定30min，PBS清洗爬片2次；经苏木素染色20min、蒸馏水冲洗、稀氨水显蓝、蒸馏水冲洗后，伊红染液染色1min，蒸馏水冲洗，晾干后中性树胶封片，显微镜下观察并拍照[1]。
HE染色法可将活细胞核染成蓝紫色，细胞质染成淡红色，凋亡细胞则表现为核染色质致密浓缩、核碎裂等。对细胞爬片进行HE染色，在显微镜下可观察到桦木酸处理SW620细胞48h后，与空白组比较，桦木酸低、中、高剂量组细胞数量均有明显减少，且随着给药浓度上升，SW620细胞凋亡数量增加，凋亡的细胞变圆变小、细胞核固缩，呈蓝黑色，并出现少量细胞坏死，表现为均质红染、无细胞核结构[1]。
参考文献
[1] 卓清缘. 桦木酸对人结肠癌细胞SW620的抑制作用及其机制研究[D]. 广州中医药大学, 2022. DOI:10.27044/d.cnki.ggzzu.2022.000343.