简介
231细胞（人三阴性乳腺癌MDA-MB-231）是经典乳腺癌体外细胞模型，具备较强增殖与侵袭转移能力。该细胞常被用于天然抗肿瘤药物药效探究，现有研究证实黄芩素可抑制231细胞增殖，并诱导细胞发生早期凋亡，是研究中药单体干预三阴性乳腺癌作用机制的常用实验载体。
231细胞的性状
培养方法
打开恒温水浴箱，温度设置37℃，从-80℃冰箱中取出231细胞冻存管并将其放在已经预热 37℃的恒温水浴箱中（用EP手套包好防止污染），待冷冻的231细胞溶化时，用75%的酒精将手及待操作物品消毒处理，进入超净操作工作台进行操作，开启细胞的冻存管加入新鲜培养液，并用移液枪把融化的231细胞液吸取到一个全新的离心管中，使用移液枪加入适量新鲜培养液，轻轻吹打混匀。把离心管放入离心机内，配平后速度800rpm离心3分钟。离心后将上清液弃出，加入足量培养液使用移液器轻轻吹打对231细胞进行重悬，再将细胞液移至培养瓶中，上下左右晃匀后标记好231细胞名称、实验者姓名和操作日期，上下左右摇匀，镜下观察细胞是否均匀分布，之后置于5% CO₂、37℃培养箱中孵育培养，观察231细胞生长状态，1-2天进行换液，整理物品并清理工作台。
提前将培养液DMEM、PBS放置于常温环境中，取出细胞培养瓶，镜下观察细胞若贴壁良好（小部分漂浮细胞）则进行换液操作。提前用紫外线灯照射消毒细胞工作台，物品进行酒精喷洒消毒后放入操作台，开启培养液及PBS，瓶盖朝上放在台面上，瓶口进行酒精灯消毒，用移液枪将培养瓶中的废液吸出弃于废液桶内，加入1mlPBS冲洗细胞，吸弃PBS，再加入5ml培养液，操作完毕将培养瓶重新放回5%CO₂、37℃培养箱中继续培养，整理物品并清理工作台，每日镜下观察细胞生长状态，当细胞生长至瓶底的70%-80%时，可进行传代[1]。
黄芩素诱导231细胞凋亡
黄芩素对人三阴性乳腺癌231细胞24小时抑制率的IC50为150.21μM，黄芩素浓度越高，细胞的增殖抑制率越高。曲长萍等人也通过实验验证了黄芩素呈程度依赖性抑制宫颈癌SiHa细胞增殖，随药物浓度增高细胞凋亡率越高，并降低癌细胞侵袭能力。为了进一步验证凋亡作用，本研究采用了流式凋亡检测实验，验证了黄芩素对231细胞的诱导凋亡作用，得出100μM和150μM黄芩素处理的凋亡率分别为26.6%和30.1%，并且主要诱导细胞在早期凋亡。在黄芩素强化三氧化二砷促进肝癌细胞凋亡的实验研究方面，周珍等人经流式细胞学测试实验，黄芩素与三氧化二砷单用，都能明显在G0/G1期因停滞而促使肝癌细胞凋亡[1]。
参考文献
[1] 纪蒲家. 黄芩素对人三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的凋亡作用机制研究[D]. 辽宁中医药大学, 2023. DOI:10.27213/d.cnki.glnzc.2023.000136.