前言
阿莫地喹(amodiaquine)为4-氨基喹啉衍生物，通过抑制裂殖体 DNA复制与转录过程,而呈现强烈地抗疟作用,可杀灭红细胞内各发育期阶段的疟原虫，无明显不良反应，孕妇及肝肾功能损害者无禁忌,临床主要用于已发作的疟疾，也可预防其发作，并可根治恶性疟。此外还可以用于阿米巴肝脓肿、肺吸虫病、肝吸虫病以及某些自身免疫性疾病。其人体内血药浓度的检测方法目前国内未见公开文献报道,而国外报道检测方法又过于复杂。
方法与结果
1、标准溶液配制
精密称取阿莫地喹10mg,置于10mL量瓶中,加甲醇溶解并定容,摇匀，即得标准品储备液,用时稀释成标准工作液。精密称取羟氯喹1mg溶于100mL甲醇中,配制成10mg/L内标溶液。
2、色谱条件
色谱柱:Hypersil Silica C18(4.6mmX150mm,5um);流动相:甲醇-水-三乙胺-磷酸(21:77.5:1:0.5,v/v);流速:1.0mL・min-1;检测波长:294nm;柱温:40℃;进样量:50uL。
3、血浆样品处理
-20℃冷冻保存的血浆在暗处自然溶化，3000r·min-1离心5min,取血1.0mL放入10mL离心管中，加入30uL内标(10mg・L-1)和0.2 mL氨水,加入4.0mL乙醚,涡旋振荡3min,离心5min(5000r・min-1),取上层乙醚3mL转移至另一试管中,氮气20℃水浴吹干。残渣加流动相120uL,涡旋振荡1min,离心1min(3000r·min-1)即得,进样量50ul。
4、色谱行为
阿莫地喹和羟氯喹的保留时间分别为8.63min和5.86min,二者分离良好,血浆中杂质对其无干扰。测得的空白血浆、标准品以及血浆样品色谱图见下图[1]。
5、标准曲线的制备
分别取空白血浆1mL,精密加入阿莫地喹标准溶液,配制成浓度为5,10,25,50,100,200,400,600,800,1000mg・L-1的标准血浆样品，加入内标羟氯喹溶液30uL(10mg/L),按“3”项下从“加入30uL内标”起对样品进行处理、测定。以阿莫地喹与羟氯喹面积比值(Y)和阿莫地喹浓度(X)进行线形回归,得回归方程为Y=3.3236X102X+1.1222,r=0.9998,结果阿莫地喹在5~1000ug/L范围内线性良好,最低检测限为5ug/L(S/N>3)。
参考文献
[1] 周于禄,刘世坤,张杰,等. 高效液相色谱法测定人血浆中阿莫地喹含量[J]. 中国医院药学杂志,2006,26(6):704-706. DOI:10.3321/j.issn:1001-5213.2006.06.023.