葡萄中含量较高的羟基酸（HCAs）主要有咖啡酰基酒石酸，单香豆酰酒石酸酯，单阿魏酰酒石酸酯和芥子酸等，其中咖啡酰基酒石酸是HCAs中主要的-种酚酸类物质，由一分子咖啡酸和一分子酒石酸酯化形成，占HCAs总量的80%~90%。咖啡酰基酒石酸主要存在于葡萄果肉中，在葡萄生长和成熟过程中转移至果汁中，因此葡萄果汁中含量较高，测定其含量对研究葡萄汁及其饮料的营养价值非常重要。
测定方法
1、色谱条件
色谱柱:ACQUITY UPLC HSS T3(2.1mm×150mm，1.8um);流动相A为含0.1%(V/V)甲酸的水，流动相B为含0.1%(V/V)甲酸的乙腈;梯度洗脱程序:0~3min:5%B;3~15min:5~20%B:15~16min:20~98%B; 16~20min:98~98%B;20~21min:98~5%B;21~23min:5~5%B;流速0.3mL/min;检测波长325nm;柱温35℃;进样量2uL。
2、对照品标准溶液的制备
精确称取咖啡酰基酒石酸对照品约5mg，加水约5mL，配成质量浓度为1.00mg/mL的母液。取适量上述母液，加水稀释，配制质量浓度为0.50、1.00、2.50、5.00、10.00、25.00、50.00ug/mL的对照品标准工作溶液。
3、对照品质量控制溶液的制备
取2节配制的咖啡酰基酒石酸对照品母液，加水稀释，配制质量浓度为2.00、10.00、20.00ug/mL的对照品质量控制溶液。
4、供试品溶液的制备
取适量葡萄汁饮料样品于50mL聚丙烯离心管中，在4000r/min离心10min，上清液用0.45um水相针式过滤器过滤，取1mL滤液供液相色谱分析。
5、样品的测定
将上述制备的对照品标准溶液，对照品质量控制溶液及供试品溶液按照1节的色谱条件进行分析，外标法定量。
取4节处理的市售葡萄汁饮料样品，按照1节的色谱条件进行分析。液相色谱谱图如图所示，图中同时给出了咖啡酰基酒石酸对照品溶液的谱图。咖啡酰基酒石酸的保留时间为7.45min，从图可以看出，葡萄汁饮料样品成分非常复杂，但是在保留时间为7.45min处没有其他干扰峰，因此初步认定该峰为咖啡酰基酒石酸。为了进一步确认，采用PDA紫外检测器在200~400nm波长范围内进行扫描，提取该峰的紫外吸收光谱图，并与咖啡酰基酒石酸对照品的紫外吸收光谱图进行比较，两者的紫外吸收谱图一致，进一步证实葡萄汁饮料样品中保留时间为7.45min的色谱峰为咖啡酰基酒石酸。
参考文献
[1] 庞海霞,马鹏程,马丽,等. 超高效液相色谱法测定葡萄汁中单咖啡酰酒石酸的含量[J]. 食品科学,2013,34(10):135-138. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201310029.