CH5132799

CH5132799抑制I型PI3Ks，尤其是PI3Kα，IC50为14 nM；对PI3Kβδγ作用效果稍弱，对PIK3CA突变型细胞系敏感。

Target	Value
PI3Kα ()	14 nM
PI3Kγ	36 nM
PI3Kβ	0.12 μM
PI3Kδ	0.50 μM

CH5132799选择性抑制I类PI3Ks，PI3Kα (IC50 = 0.014 μM )，PI3Kβ (IC50 = 0.12 μM )，PI3Kδ (IC50 = 0.50 μM )，PI3Kγ (IC50 = 0.036 μM )，但是对II类PI3Ks，III类PI3k和mTOR的抑制作用较弱，对26种蛋白激酶没有抑制活性(IC50 > 10 μM)。CH5132799对PI3Kα的致癌突变体E542K (IC50 = 6.7 nM)，E545K (IC50 = 6.7 nM)和H1047R (IC50 = 5.6 nM)比对野生型PI3Kα表现出更强的抑制活性。CH5132799处理的负荷PIK3CA突变型的乳腺癌KPL-4细胞中，Akt的磷酸化作用，和其直接底物，PRAS40与FoxO1/3a，以及下游因子，包括S6K，S6和4E-BP1的磷酸化作用，被有效抑制。负荷PIK3CA突变型的癌细胞系显著对CH5132799敏感。PI3K通路通过突变激活的人肿瘤细胞系中，CH5132799表现出有效的抗肿瘤活性[HCT116(CRC): IC50 = 0.20 lM，KPL-4(BC):13 IC50 = 0.032 lM，T-47D(BC): IC50 = 0.056 lM，SK-OV-3(卵巢)，IC50 = 0.12 lM]。CH5132799有效抑制KPL-4细胞中的AKT磷酸化。

CH5132799在几种不同的负荷PIK3CA突变型的异种移植模型中，表现出有效的体内抗肿瘤活性。CH5132799能够克服mTORC1抑制介导的Akt活化和长期依维莫司给药引起的移植瘤再生长。 CH5132799作为临床备用药，在PC-3异种移植模型中(以25 mg/kg, po, q.d.给药11 天，TGI: 101%)表现出良好的口服生物利用度(BA) (小鼠体内101%)，人肝微粒体稳定性和体内抗肿瘤活性。在小鼠，大鼠，猴子和狗体内，CH5132799表现出良好的口服生物利用度(F: 54.2-101%)。在人乳腺癌(KPL-4: PI3Ka H1047R)异种移植小鼠模型中，CH5132799 (12.5 mg/kg, q.d.)口服治疗表现出强的使肿瘤退化作用。即使间歇性给药(q.d., 给药2周/停药一周；q.d., 给药5天/停药2天)，使肿瘤退化的强烈作用在给药6周内也会保持，表明灵活的给药方案在临床上是可行的。

一般步骤：在氮气保护下，向DMF（550 mL）中加入4-氯-7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶（57.9 g，181.6 mmol）、2-氨基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)嘧啶（48.2 g，218.0 mmol）、磷酸钾（42.4 g，199.8 mmol）和水（30 mL），并进行脱气处理。随后，加入二氯双(三苯基膦)钯(II)（1.3 g，1.8 mmol），再次脱气，然后在60℃下搅拌反应2小时。反应完成后，将反应混合物冰浴冷却，加入水（750 mL），继续搅拌2小时。过滤收集沉淀，依次用水（240 mL）和丙酮（240 mL）洗涤，得到粗产物（75.6 g）。将粗产物（62.0 g）悬浮于水（1500 mL）中，50℃下搅拌1小时。过滤悬浮液，依次用水（400 mL）和丙酮（400 mL）洗涤，得到5-(7-甲磺酰基-2-吗啉-4-基-6,7-二氢-5H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)嘧啶-2-胺，为灰白色固体（53.7 g，收率96%）。

参考文献：

[1] Patent: EP2239261, 2010, A1. Location in patent: Page/Page column 38-39

[2] Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2011, vol. 21, # 6, p. 1767 - 1772