艾沙佐米柠檬酸盐

MLN9708在水溶液或血浆中立即水解为MLN2238，MLN2238是具有生物活性，MLN2238抑制20S proteasome（20S蛋白酶体）的胰凝乳蛋白酶等蛋白水解位点（β5），IC50/K_i为3.4 nM/0.93 nM，对β1作用效果稍弱，对β2几乎没有抑制活性。Phase 3。与bortezomib相比，MLN9708分离半衰期更短，药物动力学，药效，及抗癌活性更高。MLN9708是二代小分子蛋白酶体抑制剂，用于治疗多种人类恶性胶质瘤。和水溶液和血浆接触后, MLN9708快速水解为MLN2238。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。 MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4 nM，K_i值为0.93 nM。更高浓度时, MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解 (β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31 nM和3.5 µM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。MLN9708作用于实体瘤和血液方面的临床前期移植瘤时具有极高的抗癌活性。 最新临床前期药理学研究显示MLN9708作用于移植瘤，具有更短的分离半衰期，更高的药物动力学，药效，及抗癌活性。 MLN9708作用于多种移植瘤具有抗癌活性。在早期多发性骨髓瘤的临床实验阶段，MLN9708是第一个口服的蛋白酶体抑制剂。Ixazomib Citrate (MLN9708)在水溶液或血浆中立即水解为具有具有生物活性的Ixazomib (MLN2238)。Ixazomib (MLN2238)抑制20S proteasome的胰凝乳蛋白酶等蛋白水解位点（β5），无细胞试验中IC50/Ki为3.4 nM/0.93 nM，对β1作用效果稍弱，对β2几乎没有抑制活性。Ixazomib (MLN2238)可诱导自噬。Phase 3。

Target	Value
20S proteasome (Cell-free assay)	0.93 nM(Ki)
20S proteasome (Cell-free assay)	3.4 nM

与bortezomib相比，MLN9708分离半衰期更短，药物动力学，药效，及抗癌活性更高。MLN9708是二代小分子蛋白酶体抑制剂，用于治疗多种人类恶性胶质瘤。和水溶液和血浆接触后, MLN9708快速水解为MLN2238。MLN2238是MLN9708的生物活性形式。 MLN2238是氮端加帽的二肽亮氨酸硼酸，抑制20S蛋白酶体的糜蛋白酶类(β5)水解位点，IC50为3.4 nM，K _i 值为0.93 nM。更高浓度时, MLN2238也抑制20S蛋白酶体的caspase类水解 (β1)位点和胰蛋白酶类水解(β2)位点，IC50分别为31 nM和3.5 µM。MLN2238是蛋白酶体的有效选择性可逆抑制剂，这种可逆性存在时间依赖性。

MLN9708作用于实体瘤和血液方面的临床前期移植瘤时具有极高的抗癌活性。 最新临床前期药理学研究显示MLN9708作用于移植瘤，具有更短的分离半衰期，更高的药物动力学，药效，及抗癌活性。 MLN9708作用于多种移植瘤具有抗癌活性。

步骤4：合成4-(羧甲基)-2-((R)-1-(2-(2,5-二氯苯甲酰氨基)乙酰氨基)-3-甲基丁基)-6-氧代-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-4-羧酸（1-1）形式1：将柠檬酸（2.75g，14.3mmol）溶于EtOAc（85mL）中，加热至内部温度约74℃。向此溶液中加入N,N',N''-{boroxin-2,4,6-triyltris[[(1R)-3-甲基丁烷-1,1-二基]亚氨基(2-氧代乙烷-2,1-二基)]}三(2,5-二氯苯甲酰胺)（5.00g，4.87mmol）固体。让溶液自然冷却至约25℃并搅拌过夜。过滤收集沉淀，得到目标产物形式1为结晶固体（6.65g，88%）。 形式2的合成：将柠檬酸（10.1g，52.6mmol）溶于EtOAc（300mL）中，加热至内部温度约74℃。加入N,N',N''-{boroxin-2,4,6-triyltris[[(1R)-3-甲基丁烷-1,1-二基]亚氨基(2-氧代乙烷-2,1-二基)]}三(2,5-二氯苯甲酰胺)（20.0g，19.5mmol）的EtOAc（60mL）溶液。以约0.33℃/min的速率冷却至约60℃，搅拌3小时。继续以约0.12℃/min的速率冷却至约25℃，搅拌过夜。过滤收集沉淀，得到目标产物形式2为结晶固体（26.7g，98%）。 通过将柠檬酸（21g，0.11mmol）的THF（80mL）溶液加入到N,N',N''-{boroxin-2,4,6-triyltris[[(1R)-3-甲基丁烷-1,1-二基]亚氨基(2-氧代乙烷-2,1-二基)]}三(2,5-二氯苯甲酰胺)（40g，0.11mmol）的THF（80mL）溶液中，加入形式2晶种（400mg），在60℃下搅拌30分钟。缓慢加入EtOAc（400mL）超过9小时，然后在5小时内冷却至20℃，过滤得到形式2结晶固体（40g，70%）。 形式2还可通过溶解于丙酮后加入EtOAc作为抗溶剂制备。

参考文献：

[1] Patent: WO2009/154737, 2009, A1. Location in patent: Page/Page column 63