3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯（Methyl 3,5-diamino-6-chloropyrazine-2-carboxylate，CAS: 1458-01-1）为浅棕色至棕色固体，熔点为211-215 °C，分子式为C6H7ClN4O2，分子量为202.6。
3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯是重要的有机合成原料，被用于多种生物活性分子或者药物分子（例如阿米洛利）的合成。
uPA抑制剂
尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）是一种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶（TLSP），可调控广谱TLSP纤溶酶的激活。uPA 及其同源细胞表面受体uPAR在多种侵袭性恶性肿瘤中过表达，包括乳腺癌、胰腺癌、卵巢癌、头颈部癌、胃癌和前列腺癌。在过表达 uPA/uPAR的肿瘤中，uPA介导的纤溶酶原激活可激活多种下游蛋白酶（如基质金属蛋白酶、组织蛋白酶），进而引发定向的细胞周围蛋白水解及细胞外基质重塑。因此，uPA的上调是这些肿瘤细胞侵袭性和转移能力的关键决定因素。uPA上调的临床意义在淋巴结阴性乳腺癌中尤为显著，其中肿瘤 uPA 水平升高是无进展生存期和总生存期最强的预后标志物之一。基于上述背景，Michael J. Kelso课题组[1]通过标准Suzuki-Miyaura交叉偶联反应在3,5-二氨基-6-氯吡嗪-2-羧酸甲酯6位引入（杂）芳基取代基，随后对中间体甲酯进行胍基化修饰(图1)。针对该聚焦化合物库的筛选发现了相较于阿米洛利具有更高尿激酶型纤溶酶原激活物（uPA）抑制活性且对相关TLSP脱靶靶点表现出优异选择性的衍生物。先导化合物未显示利尿及抗排钾效应，其中2-苯并呋喃衍生物15在常用小鼠转移模型中显著降低肺转移灶数量。研究验证了SOSA（选择性优化侧链活性）策略可将阿米洛利转化为更强效的uPA抑制剂，并为开发该类化合物作为非细胞毒性疗法治疗uPA驱动癌症进展的新型抗转移药物提供了支持。
图1. 6-取代阿米洛利的合成
参考文献
[1] Buckley BJ, Majed H, Aboelela A, Minaei E, Jiang L, Fildes K, Cheung CY, Johnson D, Bachovchin D, Cook GM, Huang M. 6-Substituted amiloride derivatives as inhibitors of the urokinase-type plasminogen activator for use in metastatic disease. Bioorganic & medicinal chemistry letters. 2019, 29(24):126753.