简介
(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸常温下为淡黄色液体，易溶于二甲基甲酰胺等有机溶剂。该化合物属于常用的PEG修饰连接试剂，可与脱保护后的三嗪衍生物发生酰胺缩合反应合成PEG修饰型三嗪衍生物；也可在酸性环境下和多肽发生偶联反应，完成多肽的聚乙二醇化修饰，还可用于固相多肽合成。
(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸的性状
用途
(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸作为羧基类连接试剂，在缩合试剂作用下与脱保护后的三嗪衍生物发生酰胺缩合反应，用于合成PEG修饰的三嗪类目标化合物。例如：将三嗪衍生物（160 mg）溶解在50%三氟乙酸/DCM（5 mL）中。搅拌混合物2小时。通过旋转蒸发去除溶剂。将(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸（200 mg）、三嗪衍生物、HBTU（109 mg，0.286 mmol，1.2当量）和HOBt（44 mg，0.29 mmol，1.2等效）溶解在25%2,4,6-二甲基吡啶/DMF（0.5 mL）中。搅拌混合物18小时。用DCM将反应混合物稀释至200mL。用0.1M HCl（3×200mL）、10%饱和NaHCO3（水溶液）的水溶液（3×200mm L）和去离子水（3×200 mL）洗涤有机层。用无水硫酸钠干燥有机层。过滤有机层。将有机层蒸发至干。通过快速色谱法纯化粗产物[1]。
此外，(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸作为PEG修饰连接试剂，可与多肽发生缩合反应，实现多肽的聚乙二醇化修饰以制备多肽衍生物。例如：HCl（47.5 mg和0.248 mmol）溶解于(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸（46.0 mg和0.0548 mmol）和相应肽（50.0 mg和0.0548mmol）在二甲基甲酰胺（DMF）（275μL）中的溶液中。在室温下搅拌反应混合物过夜。真空除去溶剂。通过制备薄层色谱法（TLC）纯化粗产物（硅胶60 F254，0.5mm，Merck有限公司，日本），用CHCl3/MeOH＝20/1显影两次，然后用CHCl3/MeOH＝10/1显影四次，得到产物[2]。
(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸用于固相多肽合成，在多肽N端引入PEG亲水连接链，进而制备胆固醇修饰的脂肽类化合物。例如：用DMF洗涤树脂，用3当量HCTU和4当量DIPEA将(FMOC-氨基)-PEG12-C2-羧酸（1.1当量）偶联到肽的N末端。反应持续一整夜。用DMF洗涤树脂，Fmoc用20%哌啶素DMF溶液对PEG12分子进行脱保护。通过将树脂与哌啶/DMF溶液温育10分钟来实现脱保护。重复此过程3次，用DMF洗涤树脂。使用与PEG偶联相同的方法偶联胆固醇半琥珀酸盐（3当量HCTU和4当量DIPEA，过夜反应）。用DMF洗涤树脂，然后用DCM洗涤。将肽沉淀在冰冷的乙醚中。通过离心收集肽，溶于水中并冷冻干燥得到纯化脂肽[3]。
参考文献
[1] Albin, Tyler J.; et al. Linked Toll-Like Receptor Triagonists Stimulate Distinct, Combination-Dependent Innate Immune Responses. ACS Central Science (2019), 5(7), 1137-1145.
[2] Mizuno, Yuki; et al. Influence of Linker Molecules in Hexavalent RGD Peptides on Their Multivalent Interactions with Integrin αvβ3. Journal of Medicinal Chemistry (2021), 64(21), 16008-16019.
[3] Mora, Nestor Lopez; et al. Controlled Peptide-Mediated Vesicle Fusion Assessed by Simultaneous Dual-Colour Time-Lapsed Fluorescence Microscopy. Scientific Reports (2020), 10(1), 3087.