顺式白藜芦醇又名3,5,4-三羟基二苯乙烯，多酚类物质，难溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂，强抗氧化、心血管保护、提升免疫、抗肿瘤。1940年首次从毛叶藜芦根部得到.天然白藜芦醇主要以苷形式存在,常见是一种在其侧链结合一个糖基的白藜芦醇苷。人体肠内葡萄糖苷酶可将白藜芦醇苷水解成顺式与反式白藜芦醇,其中顺式结构具有多种生物学功能,其中尤以抗氧化、防止心血管疾病、提高免疫力和抗癌作用突出。本文旨在通过顺式白藜芦醇对CCl诱导小鼠急性肝损伤模型进行研究,揭示其对此类损伤潜在的预防保护作用[1]。
制备与研究
一、有机萃取：采用组织搅碎机和咖啡磨将虎杖饮片粉碎至80目(原料含水量小于10%)。取10g虎杖粉和50mL体积分数为95%乙醇一起置于组织搅碎机中，捣碎30s,负压抽滤,收集滤液,滤渣用50mL体积分数为95%乙醇反复抽提5次,合并滤液。在45℃，-0.08MPa,69~90r/min条件下浓缩至原体积的1/4,顺式白藜芦醇提取纯度为95%。
二、CCl4诱导动物急性肝损伤模型的建立：将60只昆明种小鼠随机分组,设正常对照组、急性肝损伤模型组、联苯双酯组(15mg/kg水溶混悬液)、顺式白藜芦醇高剂量(20mg/kg)、顺式白藜芦醇中剂量(15mg/kg)、顺式白藜芦醇低剂量组(10mg/kg)共6个组,每组1只。按体重20mL/kg用联苯双酯和不同剂量的顺式白藜芦醇分别进行灌胃,每天1次,正常对照组与模型组每天灌服等体积的纯净水，连续14d。最后一次用药1h后造模,除正常对照组外,其余5组小鼠均腹腔注射0.08%CCL。花生油溶液,剂量为10mL/kg;正常对照组同法腹腔注射等量的花生油,禁食(自由饮水),16h后各组经眼球后静脉丛取血，3000r/min离心10min分离血清,测定各组血清中ALT、AST、SOD、GSH-Px、MDA水平;开腹后,取肝脏,用4℃生理盐水冲洗,滤纸吸干,称重,计算肝脏系数.脏器系数(%)=脏器重量(g)/体重(g)x100%。取肝右叶相同部位的一小块肝组织，以4℃生理盐水制成10%肝匀浆,3000r/min离心10min,取上清,测定各组肝组织SOD、GSH-Px、MDA;取肝左叶标本浸于4%的甲醛溶液中,切片，苏丹皿染色，评估肝脏的脂肪变性情况。
结果
顺式白藜芦醇对CCl4、所致急性化学性肝损伤血中相关生化指标及肝重指数的影响：由表1可以看出,与正常对照组比较,急性化学性肝损伤模型组小鼠血中SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.01),而ALT、AST活性、MDA含量和肝重系数显著增加(P<0.01)。与急性化学性肝损伤模型组比较,顺式白藜芦醇各剂量组和联苯双酯阳性血中SOD、GSH-Px活性明显升高,ALT、AST活性、MDA 含量和肝重系数明显降低(P<0.01)。与顺式白藜芦醇低剂量组比较,顺式白藜芦醇中、高剂量组SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01),ALT、AST活性、MDA含量和肝重系数降低(P<0.01),与中剂量组比较,顺式白藜芦醇高剂量组SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01),ALT、AST活性和MDA含量降低(P<0.01),显示出一定的量效关系。
顺式白藜芦醇对CCl4、所致急性化学性肝损伤肝脏相关生化指标及组织病理的影响：由表2可以看出，与正常对照组比较,急性化学性肝损伤模型组小鼠肝脏 SOD、GSH-Px活性显著降低(P<0.01),而MDA含量显著增加(P<0.01)。与急性化学性肝损伤模型组比较,顺式白藜芦醇各剂量组和联苯双酯阳性血中SOD、GSH-Px活性明显升高,MDA含量明显降低(P<0.01)。与顺式白藜芦醇低剂量组比较,顺式白藜芦醇中、高剂量组 SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),与中剂量组比较,顺式白藜芦醇高剂量组SOD、GSH-Px活性升高(P<0.01),MDA含量降低(P<0.01),显示出一定的量效关系。此外,顺式白藜芦醇各剂量的肝脏病理组织检查评分均明显低于急性化学性肝损伤模型组(P<0.01)。
讨论
众多研究表明,当机体摄人CCl4时,可以大大影响血清ALT、AST活性。同时体内肝组织细胞中的自由基代谢平衡就会失调,对自由基的防御能力也会下降,过量自由基可使生物膜脂质双分子层中的不饱和脂肪酸过氧化,而形成脂质过氧化产物,从而使膜结构和功能发生障碍。过氧化脂质的代谢产物MDA,进一步与磷脂酰乙醇胺和蛋白质交联,生成无活性脂褐质,沉积于组织细胞,破坏细胞膜结构,最后导致细胞无法维持正常代谢而死亡。本文的结果表明,与模型组比较,顺式白藜芦醇各剂量组血清与肝脏组织中MDA含量均明显减少,说明顺式白藜芦醇可以抑制CCl4，所致急性化学性肝损伤模型小鼠MDA含量的升高。综上所述，本文表明顺式白藜芦醇可以降低血清ALT、AST活性和肝脏组织中MDA含量，升高血清与肝组织中SOD、GSH-Px活性,并降低肝细胞脂化堆积,有效缓解CCl4对肝脏组织的损伤影响[1]。
参考文献
[1]裴凌鹏. 顺式白藜芦醇对小鼠急性肝损伤的预防研究[J]. 首都师范大学学报（自然科学版）,2009,30(4):40-43. DOI:10.3969/j.issn.1004-9398.2009.04.009.