简介
蔗果三糖（1-kestose）是低聚果糖系列中最简单的成员，由一分子葡萄糖与两分子果糖通过β-2,1键连接而成，为白色无定形粉末，极易溶于水，微溶于乙醇，不溶于丙酮；甜度约为蔗糖的30 %，兼具益生元与膳食纤维双重功能。研究人员针对我国蔗果三糖国家实物标准缺乏的现状，研制蔗果三糖标准样品，建立了蔗果三糖标准样品的分离、纯化方法，根据 GB/T 15000.3-2008《标准样品工作导则（3）标准样品定值的一般原则和统计方法》的要求，对制备得到的蔗果三糖标准样品进行了均匀性、稳定性和定值研究。通过统计学数据处理，蔗果三糖标准样品的定值结果为：标准值99.87%，置信度为95%的不确定度值0.36%。该标准样品符合国家一级标准样品的技术要求，填补了国内该领域的研究空白。该标准样品的研制为低聚果糖相关产品的分析检测、质量控制等工作提供了物质基础，保证检测结果的准确性、可比性和溯源性。同时，为低聚果糖类国家标准样品的研制提供了研制范例[1]。
蔗果三糖的性状
合成
将相应的酸直接悬浮在MeOH（c = 0.1 M）中。将NaOMe （5 M/L in MeOH, 0.26 mL, 1.32 mmol, 1.0 equiv）在25°C下加入混合物中。搅拌反应30分钟。用Amberlite IR 120 （H+）树脂中和原油，然后过滤。在真空中浓缩滤液。用闪柱色谱法纯化残渣（ch2cl2 /MeOH = 6:1 ~ 4:1, v/v）得到产物蔗果三糖[2]。
纯化方法
取低聚果糖总样2.0 g，溶解于5 mL纯净水中，采用P-2凝胶色谱进行富集，流动相为纯净水，流速为0.3 mL/min，每4 mL接一管，根据液相分析结果，收集蔗果三糖粗样，冷冻干燥得到蔗果三糖粗品；将收集的蔗果三糖粗品溶解于70 %乙腈中，经制备高效液相色谱分离纯化，流动相为乙腈-水（70 : 30，体积比），流速为10 mL/min，根据色谱峰收集蔗果三糖馏分，减压浓缩去除有机溶剂，剩余溶液冷冻干燥后得到蔗果三糖单体[1]。
含量测定
薄层色谱检测结果显示，展开剂为氯仿-甲醇-乙酸（1 : 1 : 0.05，体积比）时，Rf值为0.64；展开剂为正丁醇-异丙醇-甲醇（3: 12 : 4，体积比）时，Rf值为0.62，符合薄层检测的要求，显色后结果显示样品纯净，未见杂质。采用HPLC-ELSD对蔗果三糖样品进行分析，扣除溶剂峰，对色谱峰进行面积归一化定量，所得蔗果三糖的纯度分析结果为99.88 %[1]。
参考文献
[1] 段文娟,魏远安,陈子健,等. 蔗果三糖标准样品的研制 [J]. 食品研究与开发, 2017, 38 (02): 180-185.
[2] Iterative Synthesis of Inulin-Type Fructooligosaccharides Enabled by Stereoselective β-D-Fructofuranosylation By: Zou, Liang-Jing; et al. Journal of Organic Chemistry (2022), 87(22), 15273-15288.